Tampó fosfat salí

De Viquipèdia
Salta a la navegació Salta a la cerca
Per a altres significats, vegeu «PBS».

El tampó fosfat salí (també conegut per les seves sigles en anglès, PBS, de phosphate buffered saline) és una solució tampó generalment utilitzada en recerca biològica. Es tracta d'una solució aquosa salina que conté fosfat d'hidrogen del sodi, clorur de sodi i, dins algunes formulacions, clorur de potassi i fosfat de monopotassi. L'osmolaritat i concentracions d'ions (Cl-, Na+ i K+) de les solucions corresponen a les del fluid extracel·lular cos humà i les de molts mamífers (isotònic).

Aplicacions[modifica]

El PBS té molts usos perquè és isotònic i no és tòxic per a la majoria de cèl·lules. D'entre aquests usos s'inclouen la dilució de substàncies utilitzades per al cultiu cel·lular i per a escurar els recipients contenidors de cèl·lules. El PBS amb EDTA també s'empra per a desfer aglomeracions de cèl·lules. Alguns metalls divalents com zinc, tanmateix, no poden ser afegits, ja que això comportarà precipitació. Per aquests tipus d'aplicacions són recomanats els agents amortidors de Good.

Preparació[modifica]

Hi ha moltes maneres diferents de preparar PBS. Algunes formulacions no contenen potassi, mentre altres contenen calci o magnesi.[1]

La composició més comuna de PBS (1X)
Sal Concentració (mmol/L) Concentració (g/L)
  NaCl   137 8.0
  KCl   2.7 0.2
  Na2HPO4   10 1.42
  KH2PO4   1.8 0.24

Es comença amb 800 ml d'aigua destil·lada per a dissoldre totes les sals. S'ajusta el pH a 7.4 amb HCl. S'afegeix aigua destil·lada a un volum total d'1 litre. El PBS 1x resultant hauria de tenir una concentració final de 10 mM PO43−, 137 mM NaCl, i 2.7 mM KCl.

Protocol Cold Spring Harbor
Reactiu MW Massa (g) 10X [M] 10X Massa (g) 5X [M] 5X Massa (g) 1X [M] 1X
Na2HPO4 141.95897 14.1960 0.1000 7.0980 0.0500 1.41960 0.0100
KH2PO4 136.08569 2.4496 0.0180 1.2248 0.0090 0.24496 0.0018
NaCl 58.44300 80.0669 1.3700 40.0335 0.6850 8.00669 0.1370
KCl 74.55150 2.0129 0.0270 1.0064 0.0135 0.20129 0.0027
PH = 7.4

La manera més senzilla de preparar una solució de PBS és fent servir pastilles o tauletes de tampó PBS. Són formulats per donar una solució de PBS llesta per a fer servir en una quantitat especificada d'aigua destil·lada. Es troben disponibles en els volums estàndards: 100, 200, 500 i 1000 ml, i 10, 25, 50 i 100 L.[2]

Si s'empra per a cultius cel·lulars, la solució pot ser dispensada a alíquotes, però no s'ha d'esterilitzar per autoclau, sinó per filtració. L'esterilització pot no ser necessària depenent del seu ús. El PBS pot ser emmagatzemat a temperatura ambient o a la nevera. Tanmateix, les solucions concentrades poden precipitar quan es refreden i haurien de ser mantingudes a temperatura ambient fins que el precipitat s'hagi dissolt completament abans que no es faci servir.

Referències[modifica]

  1. Dulbecco, R. «Plaque formation and isolation of pure lines with poliomyelitis viruses». J. Exp. Med., vol. 99, 2, 1954, pàg. 167–182. DOI: 10.1084/jem.99.2.167. PMC: 2180341. PMID: 13130792.
  2. Medicago AB, (2010) Phosphate buffered saline specification sheet