Α-Amilasa

De la Viquipèdia, l'enciclopèdia lliure
(S'ha redirigit des de: Α-Amilasa (proteïna))
Infotaula de proteïnaAlfa-amilasa
Amilasa salival humana; es pot observar un ió calci de color groc, i un ió clorur en verd. Adaptat de PDB Plantilla:PDBe[1]
Substànciafamília d'enzims Modifica el valor a Wikidata

La α-amilasa (alfa-amilasa) és un enzim (EC 3.2.1.1 3.2.1.1) que catalitza la hidròlisi dels enllaços alfa-glucosídics, dels polisacàrids alfa glucosídics d'alt pes molecular, tals com el midó i el glicogen, alliberant glucosa i maltosa. És la principal amilasa en humans i altres mamífers. També es troba present en llavors que contenen midó, i és secretada per molts fongs.[2]

En humans, aquest enzim presenta 511 aminoàcids.[3]

Fisiologia humana[modifica]

Encara que es troba en molts teixits, l'amilasa és més prominent en el suc pancreàtic i la saliva, els quals posseeixen cadascun la seva pròpia isoenzima de α-amilasa humana. Aquests enzims tenen un comportament diferents en el isoelectroenfoque, i poden ser separades en determinacions utilitzant anticossos monoclonales. En els éssers humans, totes les formes d'amilasa es troben codificades en el cromosoma 1 (1p21, vegeu AMY1A).

Amilasa salival (ptialina)[modifica]

La saliva conté amilasa que hidrolitza el midó per formar maltosa i dextrina. Aquesta isoforma de l'amilasa es coneix també com a ptialina, nomenada així pel químic suec Jöns Jacob Berzelius, el nom deriva de la paraula grega πτυω (ptiō, escopir), a causa que la substància es va obtenir de la saliva. La ptialina hidrolitza les grans molècules de midó insoluble, per formar midons solubles (amilodextrina, eritrodextrina i acrodextrina), produint successivament molècules de midons cada vegada més petites, fins a formar al final maltosa. La ptialina actua sobre els enllaços glicosídics α(1,4), però la hidròlisi completa requereix un enzim que actuï a més sobre els productes ramificats. L'amilasa salival resulta inactivada en l'estómac per l'àcid gàstric. En el suc gàstric a pH 3,3 la ptialina resulta totalment inactivada en 20minuts a 37 °C. En contrast, després de 150 minuts en suc gàstric a pH 4,3, encara es reté el 50% de l'activitat amilasa. Tant el midó, el substrat per a la ptialina, com el producte, polímers de glucosa de cadena curta, són capaces de protegir-la parcialment contra la inactivación deguda a l'àcid gàstric. En afegir ptialina a una solució tamponada a pH 3,0, aquesta resulta totalment inactivada en 120 minuts; no obstant això l'addició de midó al 0,1% produeix que després de 120 minuts la solució encara conservi 10% d'activitat amilasa; i l'addició de midó al 1,0 permet el manteniment del 40% de l'activitat amilasa als 120 minuts.[4]

Condicions òptimes per a l'amilasa[modifica]

pH òptim - 5.5 a 8.0 [5]
Temperatura òptima - 37 °C
Presència de certs iónes i activadores:
Clorur i bromur - són els més efectius
Iodur – menys efectiu
Sulfat i fosfat – són els menys efectius

Variacions genètiques de l'amilasa salival en humans[modifica]

El gen de l'amilasa salival ha sofert duplicacions durant l'evolució, i els estudis d'hibridació d'ADN indiquen que molts individus posseeixen múltiples repeticions en tàndem del gen. El nombre de còpies del gen es correlacionis amb els nivells d'amilasa salival, com pot ser mesurada per assajos tipus blot utilitzant anticossos contra l'amilasa humana. El nombre de còpies del gen es troba aparentment associat amb l'exposició evolutiva a dietes riques en midó. Per exemple, un individu japonès posseeix 14 còpies del gen de l'amilasa (un al·lel amb 10 còpies, i un segon al·lel amb quatre còpies). La dieta japonesa, tradicionalment, conté grans quantitats de midó provinent de l'arròs. En contrast, un individu de l'ètnia biaka en posseeix només sis (tres còpies en cada al·lel). Els biaka són caçadors-recol·lectors de la selva humida que tradicionalment han consumit baixes quantitats de midó en la seva dieta. Perry i col·legues han especulat que aquest augment en el nombre de còpies del gen de l'amilasa salival va poder haver exercit un paper en l'augment de la supervivència durant la transició a dietes riques en midó durant l'evolució humana.[6]

Amilasa pancreàtica[modifica]

La α-amilasa pancreàtica escindeix aleatòriament els enllaços α(1-4) glicosídics de l'amilosa per produir dextrina, maltosa o maltotriosa. Aquest enzim adopta un mecanisme de doble desplaçament amb retenció de la configuració anomèrica.

En patologia[modifica]

La determinació d'amilasa en sang és molt més senzilla de dur a terme que la de lipasa, fent d'aquesta determinació l'elecció primària per a la detecció i monitoratge de pancreatitis. Els laboratoris mèdics en general mesuren ja sigui l'amilasa pancreàtica o l'amilasa total. Si només es mesura l'amilasa pancreàtica, un augment d'aquesta no tindrà relació amb galteres o algun altre tipus d'inflamació o trauma de les glàndules salivals.

No obstant això, a causa de la molt petita quantitat present en sang, la sincronització i rapidesa és essencial quan es fa l'extracció de sang per a aquest mesurament. La sang hauria de ser presa molt poc temps després de l'aparició d'un còlic de dolor pancreàtic, perquè d'una altra forma, l'enzim ràpidament és excretada pels ronyons cap a l'orina.

La α-amilasa salival ha estat utilitzada com un biomarcador d'estrès que no requereix d'una extracció de sang.[7]

Interpretació[modifica]

Es troben nivells elevats d'amilasa en plasma en:

Una amilasa total amb valors 10 vegades o més per sobre del límit superior de referència és suggestiva d'una pancreatitis. De cinc a deu vegades el valor normal pot indicar una afecció de l'ili o duodè, o una fallada renal, i elevacions més baixes són troballes freqüents en malalties de les glàndules salivals.

Gens[modifica]

  • Salival - AMY1A, AMY1B, AMY1C
  • Pancreàtica - AMY2A, AMY2B

Usos industrials[modifica]

La α-amilasa s’obté a partir de bacteris, llevats o fongs[8] i s’utilitza a escala industrial en la hidròlisi del midó present als grans de cereal. Aquesta hidròlisi produeix sucres fermentables que es poden transformar en etanol. El primer pas en la producció de xarops d'alta fructosa és el tractament del blat de moro amb α-amilasa, produint-se cadenes curtes d'oligosacàrids.

Una α-amilasa anomenada Termamyl, extreta de Bacillus licheniformis, s’utilitza també en alguns detergents, especialment en els rentavaixelles gràcies a la seva efectivitat eliminant el midó.[9]

L'enginyeria genètica de microorganismes permet la cerca de noves variants de la proteïna per afavorir la seva estabilitat en condicions extremes, ja sigui en altes temperatures [10] o en gradients de pH molt àcids.[11]

Arquitectura de dominis[modifica]

Les α-amilases contenen diversos dominis proteics diferents.

El domini catalític té una estructura secundaria consistent en vuit barrils alfa/beta encadenats que contenen el lloc actiu, interromput perun domini d'unió al calci format per uns 70 aminoàcids que sobresurten entre la tercera làmina beta i la tercera hèlix alfa. També té un domini C-terminal barril beta amb un motiu de clau grega.[12]  

Algunes α-amilases contenen un domini amb forma de làmina beta al seu extrem C-terminal, aquest domini es troba format per cinc cadenes antiparal·leles en conformació de làmina beta.[13][14]

Altres α-amilases contenen també un domini tot-beta al seu extrem C-terminal.[15]

Inhibició per tampó Tris[modifica]

S’ha publicat que la molècula Tris pot inhibir un cert nombre α-amilases bacterianes.[16][17] No seria convenient utilitzar α-amilasa en solucions tamponades amb Tris.

Proteïna[modifica]

Infotaula de proteïnaΑ-Amilasa
Substànciaproteïna Modifica el valor a Wikidata
Identificadors
RefSeqNP_001008220, NP_001333709, XP_016856547, NP_001008222, NP_004029, NP_001008219 i XP_011539564 Modifica el valor a Wikidata
P04745 Modifica el valor a Wikidata
PDB1C8Q, 1JXJ, 1JXK, 1MFU, 1MFV, 1NM9, 1Q4N, 1SMD, 1XV8, 1Z32, 3BLK, 3BLP i 3DHP Modifica el valor a Wikidata

Α-Amilasa (AASH) és una proteïna de mamífer que es troba tant en les secrecions pancreàtiques com en les salivals de l'Homo sapiens i que produeix l'enzim Α-Amilasa que contribueix a la digestió dels aliments.[18]

La similitud entre la proteïna del pàncrees i la de la saliva és del 97% i la produeixen dos gens molt similars, l'AMY1 i l'AMY1. La proteïna A-Amilasa és el producte de tres gens, AMY1A, AMY1B i AMY1C, que codifiquen per tres seqüències proteiques idèntiques, però mostren variacions interindividuals en el número de còpies, i per tant en l'expressió de la proteïna. El seu nom químic és α-1,4-D-glucà glucanohidrolasa. És una proteïna monomèrica i unidora de calci amb una simple cadena polipeptídica de 496 aminoàcids. Té tres dominis, l'A està format pels residus 1-99 i 170-404; el B format pels residus 100-169, i el C format pels residus 405-496.[18]

Referències[modifica]

  1. ↑ Ramasubbu, N.; Paloth, V.; Luo, Y.; Brayer, G. D.; Levine, M. J. «Structure of human salivary alpha-amylase at 1.6 A resolution: implications for its role in the oral cavity». Acta Crystallographica. Section D, Biological Crystallography, 52, Pt 3, 01-05-1996, pàg. 435–446. DOI: 10.1107/S0907444995014119. ISSN: 0907-4449. PMID: 15299664 [Consulta: 8 agost 2016].
  2. ↑ Stedman, Thomas Lathrop. Stedman's medical dictionary.. 27th ed. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins, 2000. ISBN 0-683-40007-X. 
  3. ↑ «Sequence Alignment of the alpha-Amylase Protein (Homo sapiens) (with Clustalw)» (en anglès). Arxivat de l'original el 2007-12-06.
  4. ↑ Rosenblum, J. L.; Irwin, C. L.; Alpers, D. H. «Starch and glucose oligosaccharides protect salivary-type amylase activity at acid pH». The American Journal of Physiology, 254, 5 Pt 1, 1988-05-XX, pàg. G775–780. DOI: 10.1152/ajpgi.1988.254.5.G775. ISSN: 0002-9513. PMID: 2452576.
  5. ↑ «Amylase, Alpha - Worthington Enzyme Manual». [Consulta: 20 abril 2021].
  6. ↑ Perry, George H; Dominy, Nathaniel J; Claw, Katrina G; Lee, Arthur S; Fiegler, Heike «Diet and the evolution of human amylase gene copy number variation» (en anglès). Nature Genetics, 39, 10, 2007-10, pàg. 1256–1260. DOI: 10.1038/ng2123. ISSN: 1061-4036. PMC: PMC2377015. PMID: 17828263.
  7. ↑ Noto, Yuka; Sato, Tetsumi; Kudo, Mihoko; Kurata, Kiyoshi; Hirota, Kazuyoshi «The relationship between salivary biomarkers and state-trait anxiety inventory score under mental arithmetic stress: a pilot study». Anesthesia and Analgesia, 101, 6, 2005-12, pàg. 1873–1876. DOI: 10.1213/01.ANE.0000184196.60838.8D. ISSN: 0003-2999. PMID: 16301277.
  8. ↑ Avdiiuk, K. V.; Varbanets', L. D. «[Microbial alpha-amylases: physicochemical properties, substrate specificity and domain structure]». Ukrains'kyi Biokhimichnyi Zhurnal (1999), 85, 4, 2013-07-XX, pàg. 5–19. PMID: 24319968.
  9. ↑ Bravo Rodríguez, V.; Jurado Alameda, E.; Martínez Gallegos, J. F.; Reyes Requena, A.; García López, A. I. «Enzymatic hydrolysis of soluble starch with an alpha-amylase from Bacillus licheniformis». Biotechnology Progress, 22, 3, 2006-05-XX, pàg. 718–722. DOI: 10.1021/bp060057a. ISSN: 8756-7938. PMID: 16739954.
  10. ↑ Joyet, P.; Declerck, N.; Gaillardin, C. «Hyperthermostable variants of a highly thermostable alpha-amylase». Bio/Technology (Nature Publishing Company), 10, 12, 1992-12-XX, pàg. 1579–1583. DOI: 10.1038/nbt1292-1579. ISSN: 0733-222X. PMID: 1369206.
  11. ↑ Priyadharshini, Ramachandran; Manoharan, Shankar; Hemalatha, Devaraj; Gunasekaran, Paramasamy «Repeated Random Mutagenesis of alpha-Amylase from Bacillus licheniformis for Improved pH Performance». Journal of Microbiology and Biotechnology, 20, 12, 2010-12, pàg. 1696–1701. ISSN: 1738-8872. PMID: 21193826.
  12. ↑ Abe, Akemi; Yoshida, Hiromi; Tonozuka, Takashi; Sakano, Yoshiyuki; Kamitori, Shigehiro «Complexes of Thermoactinomyces vulgaris R-47 alpha-amylase 1 and pullulan model oligossacharides provide new insight into the mechanism for recognizing substrates with alpha-(1,6) glycosidic linkages». The FEBS journal, 272, 23, 2005-12, pàg. 6145–6153. DOI: 10.1111/j.1742-4658.2005.05013.x. ISSN: 1742-464X. PMID: 16302977.
  13. ↑ Kadziola, A.; Søgaard, M.; Svensson, B.; Haser, R. «Molecular structure of a barley alpha-amylase-inhibitor complex: implications for starch binding and catalysis». Journal of Molecular Biology, 278, 1, 24-04-1998, pàg. 205–217. DOI: 10.1006/jmbi.1998.1683. ISSN: 0022-2836. PMID: 9571044.
  14. ↑ Kadziola, A.; Abe, J.; Svensson, B.; Haser, R. «Crystal and molecular structure of barley alpha-amylase». Journal of Molecular Biology, 239, 1, 27-05-1994, pàg. 104–121. DOI: 10.1006/jmbi.1994.1354. ISSN: 0022-2836. PMID: 8196040.
  15. ↑ Machius, M.; Wiegand, G.; Huber, R. «Crystal structure of calcium-depleted Bacillus licheniformis alpha-amylase at 2.2 A resolution». Journal of Molecular Biology, 246, 4, 03-03-1995, pàg. 545–559. DOI: 10.1006/jmbi.1994.0106. ISSN: 0022-2836. PMID: 7877175.
  16. ↑ Ghalanbor, Zahra; Ghaemi, Nasser; Marashi, Sayed-Amir; Amanlou, Massoud; Habibi-Rezaei, Mehran «Binding of Tris to Bacillus licheniformis alpha-amylase can affect its starch hydrolysis activity». Protein and Peptide Letters, 15, 2, 2008, pàg. 212–214. DOI: 10.2174/092986608783489616. ISSN: 0929-8665. PMID: 18289113.
  17. ↑ Aghajari, N.; Feller, G.; Gerday, C.; Haser, R. «Crystal structures of the psychrophilic alpha-amylase from Alteromonas haloplanctis in its native form and complexed with an inhibitor». Protein Science: A Publication of the Protein Society, 7, 3, 1998-03-XX, pàg. 564–572. DOI: 10.1002/pro.5560070304. ISSN: 0961-8368. PMC: 2143949. PMID: 9541387.
  18. ↑ 18,0 18,1 Lamby Tovar, Claudia Patricia; Gómez González, Olga Lucia; Jaramillo Gómez, Lorenza María «La α-amilasa salival: relación con la caries dental y la salud en general». Universitas Odontológica, 32, 69, 2013, pàg. 93–101. ISSN: 2027-3444.

Enllaços externs[modifica]

Obtingut de «https://ca.wikipedia.org/w/index.php?title=Α-Amilasa&oldid=32782969#Proteïna»